Syfilisova analýza, jak k tomu dochází

V online laboratoři Lab4U chceme, aby se každý z vás staral o své zdraví. Abychom to mohli udělat, mluvíme jednoduše a jasně o ukazatelích těla.

V online laboratoři Lab4U se provádějí sérologické studie k detekci patogenních antigenů a specifických protilátek proti nim - jedná se o nejpřesnější metodu diagnostiky infekčních chorob. "Proč potřebujeme provést diagnostiku protilátek k diagnostice infekcí?" Taková otázka může nastat poté, co je lékař předán laboratoři. Zkusme na to odpovědět.

Co jsou to protilátky? A jak dešifrovat výsledky analýzy?

Protilátky jsou proteiny, které imunitní systém vytváří v reakci na infekci. V laboratorní diagnostice slouží jako marker infekce protilátky. Obecným pravidlem pro přípravu na test na protilátky je darování krve ze žíly na lačný žaludek (po jídle musí uplynout nejméně čtyři hodiny). V moderní laboratoři je krevní sérum testováno na automatickém analyzátoru s použitím vhodných činidel. Testování sérových protilátek je někdy jediným způsobem diagnostiky infekčních chorob..

Testy na infekce mohou být kvalitativní (uveďte odpověď, pokud existuje infekce v krvi) a kvantitativní (ukazují hladinu protilátek v krvi). Míra protilátek je u každé infekce jiná (u některých by neměla být vůbec). Výsledkem analýzy mohou být referenční hodnoty (normální hodnoty) protilátek.
V online laboratoři Lab4U můžete provádět komplexní testy na všechny infekce TORCH najednou as 50% slevou!

Různé třídy protilátek IgG, IgM, IgA

Enzymově vázaný imunosorbentový test určuje protilátky proti infekcím patřícím do různých tříd Ig (G, A, M). Protilátky proti viru jsou v přítomnosti infekce detekovány ve velmi raném stádiu, což poskytuje účinnou diagnostiku a kontrolu průběhu nemocí. Nejběžnější metody diagnostiky infekcí jsou testy na protilátky třídy IgM (akutní fáze průběhu infekce) a protilátky třídy IgG (rezistentní na infekci). Tyto protilátky jsou pro většinu infekcí..

Jeden z nejčastějších testů - nemocniční screening (testy na HIV, syfilis a hepatitidu B a C) však nerozlišuje typ protilátek, protože přítomnost protilátek proti virům těchto infekcí automaticky naznačuje chronický průběh nemocí a je kontraindikací například pro závažné chirurgické zákroky. Proto je důležité diagnózu vyvrátit nebo potvrdit..

Podrobná diagnostika typu a množství protilátek u diagnostikovaného onemocnění může být provedena průchodem analýzy pro každou konkrétní infekci a typ protilátky. Primární infekce je detekována, když je ve vzorku krve detekována diagnosticky významná hladina protilátek IgM nebo je-li signifikantně zvýšen počet protilátek IgA nebo IgG v párovém séru odebraném v intervalech 1-4 týdnů.

Reinfekce nebo reinfekce je detekována rychlým zvýšením hladiny IgA nebo IgG protilátek. Protilátky IgA mají vyšší koncentraci u starších pacientů a přesněji diagnostikují současnou infekci u dospělých.

Přenesená infekce v krvi je definována jako zvýšené IgG protilátky bez zvýšení jejich koncentrace ve spárovaných vzorcích odebraných v intervalech 2 týdnů. Neexistují žádné protilátky tříd IgM a A.

IgM protilátky

Jejich koncentrace stoupá brzy po nemoci. IgM protilátky jsou detekovány již 5 dnů po začátku a vrchol v intervalu od jednoho do čtyř týdnů, poté klesají na diagnosticky nevýznamné hladiny během několika měsíců i bez léčby. Pro úplnou diagnózu však nestačí určit pouze protilátky třídy M: nepřítomnost této třídy protilátek neznamená nepřítomnost choroby. Neexistuje žádná akutní forma onemocnění, ale může být chronická.

IgM protilátky mají velký význam v diagnostice hepatitidy A a dětských infekcí (zarděnky, černého kašle, planých neštovic), snadno přenášitelné vzduchovými kapičkami, protože je důležité identifikovat nemoc a izolovat pacienta co nejdříve.

IgG protilátky

Hlavní úlohou protilátek IgG je dlouhodobá ochrana těla proti většině bakterií a virů - ačkoli je jejich produkce pomalejší, reakce na antigenní podnět zůstává stabilnější než reakce protilátek IgM..

Hladiny IgG protilátek rostou pomaleji (15-20 dní po nástupu onemocnění) než IgM, ale zůstávají zvýšené déle, proto mohou při nepřítomnosti IgM AT vykazovat dlouhodobou infekci. IgG může být nízký po mnoho let, ale když jsou znovu vystaveny stejnému antigenu, hladiny protilátek IgG rychle stoupají.

Pro kompletní diagnostický obraz je nutné stanovit protilátky IgA a IgG současně. Pokud není výsledek IgA jasný, provede se potvrzení stanovením IgM. V případě pozitivního výsledku a přesné diagnózy by se měla druhá analýza, která se provádí 8-14 dní po první, zkontrolovat souběžně, aby se stanovilo zvýšení koncentrace IgG. Výsledky analýzy by měly být interpretovány ve spojení s informacemi získanými v jiných diagnostických postupech..

K diagnostice Helicobacter pylori, jedné z příčin vředů a gastritidy, se používají zejména IgG protilátky..

IgA protilátky

Vyskytují se v séru 10-14 dní po nástupu nemoci a zpočátku se dokonce nacházejí v semenných a vaginálních tekutinách. Hladiny protilátek IgA obvykle klesnou o 2–4 měsíce po infekci, pokud je léčba úspěšná. Po reinfekci opět stoupá hladina protilátek IgA. Pokud hladina IgA po léčbě neklesne, je to příznak chronické formy infekce.

Analýza protilátek v diagnostice TORCH infekcí

Zkratka TORCH se objevila v 70. letech minulého století a skládá se z velkých písmen latinských jmen skupiny infekcí, jejíž charakteristickou vlastností je, že s relativní bezpečností pro děti a dospělé jsou infekce TORCH během těhotenství extrémně nebezpečné.

Krevní test na infekci TORCH je komplexní studie, která zahrnuje 8 testů:

Infekce ženy infekcemi komplexu TORCH během těhotenství (přítomnost pouze IgM protilátek v krvi) je známkou jejího přerušení..

Konečně

Někdy, když v analýze najdou protilátky IgG, například toxoplasmóza nebo herpes, panika u pacientů, aniž by se podívali na skutečnost, že protilátky IgM, které vykazují přítomnost současné infekce, mohou zcela chybět. V tomto případě analýza ukazuje na předchozí infekci, vůči níž se vyvinula imunita.

V každém případě je lepší svěřit interpretaci výsledků analýzy lékaři a v případě potřeby s ním určit taktiku léčby. A můžete nám důvěřovat, že budeme testovat.

Proč je rychlejší, pohodlnější a výhodnější provádět testy v laboratoři Lab4U?

Na recepci nemusíte čekat dlouho

Veškerá registrace a platba objednávky probíhá online za 2 minuty.

Cesta do zdravotnického centra nebude trvat déle než 20 minut

Naše síť je druhou největší v Moskvě a jsme také ve 23 městech Ruska.

Částka šeku vás neohrozí

Na většinu našich analýz se vztahuje permanentní 50% sleva..

Nemusíte přijít minutu za minutu ani čekat ve frontě

Analýza se předkládá záznamem ve vhodném časovém období, například od 19 do 20.

Na výsledky nemusíte dlouho čekat ani na ně jít do laboratoře

Zašleme je na e-mail. mail v době připravenosti.

Syphilis RPR (antikardiolipinový test / precipitační mikroreakce), titr

Test detekuje protilátky proti kardiolipinu (lipid, který je součástí membrány mitochondrie a bakterií). Tyto protilátky jsou přítomny v krvi u pacientů se syfilisem..

Nespecifický antifosfolipidový (reaginský) test, moderní analog Wassermannovy reakce (RW).

Nontreponemální test, rychlý plazmatický reaginový test, syfilitní screeningový test, STS.

Jaké biomateriály lze použít pro výzkum?

Jak se připravit na studii?

  • Před studií nekouřte 30 minut..

Přehled studie

Příčinou syfilis je Treponema pallidum (bledý treponema), bakterie z čeledi spirochete.

Syfilis je pohlavně přenosná nemoc: nejčastěji se přenáší sexuálně. Kromě toho je možná infekce krví (například sdílením injekčních stříkaček, břitev atd.), Plodu od matky nebo cestou domácnosti (velmi vzácné).

Mezinárodní klasifikace nemocí rozlišuje vrozenou, časnou a pozdní syfilis, jakož i nespecifikované formy. Lékařská literatura používá pojmy primární, sekundární a terciární syfilis.

Inkubační doba začíná od okamžiku infekce a trvá do prvních příznaků (Chancre) v průměru 21 dní (od 10 do 90 dnů).

Primární syfilis je stadium od počátku tvrdého chancre po vzhled vyrážky. Masivní řev je bolest, která se může objevit v místě, kde patogen vstoupil do těla (obvykle na genitáliích). Nebolí a zmizí (bez ošetření) po 2-6 týdnech. Také ve stejné fázi se lymfatické uzliny někdy zvětšují. Zpočátku zůstává nemocný séronegativní (tj. V jeho krvi zatím nejsou protilátky proti syfilisu)..

Sekundární syfilis. Asi 4-8 týdnů po objevení se chancre se objevují nové příznaky: vyrážka a celková nevolnost, horečka, bolesti hlavy atd. Jsou možné další závažné projevy..

Potom příznaky syfilis zmizí a nemoc přechází do latentní fáze. V tomto případě patogen stále neopouští tělo, takže se oslabením imunitního systému může dojít k relapsu onemocnění. Jejich příznaky se shodují s projevy sekundárních syfilis.

Stává se, že syfilis zůstává v latentní formě. Ale v některých případech, pokud se člověk neléčí, se v průběhu let vyvíjí terciární syfilis. V tomto případě jsou ovlivněny různé orgány a tkáně: nervový a kardiovaskulární systém, kosti, klouby atd..

K diagnostice syfilis se často používají sérologické testy (založené na detekci protilátek). Všechny typy analýz lze rozdělit do dvou skupin: treponemální a nontreponemální testy. Syphilisova RPR analýza je nerereponemální.

Treponemální testy odhalují protilátky proti specifickým bakteriím T. Pallidum, jako je RPHA syfilis (pasivní hemaglutinační test) nebo RIF syfilis (imunofluorescenční reakce)..

Prostřednictvím nerereponemálních testů jsou detekovány protilátky proti kardiolipinu (lipid, který je součástí membrány mitochondrie a bakterií). Vyskytují se v lidském těle od stadia primárního syfilisu (asi týden po výskytu tvrdého chancre). U nel Treponemálních metod analýzy pro syfilis se nerozlišuje typ protilátek (IgG, IgM atd.), Ale stanoví se celková odpověď. Tyto studie zahrnují precipitační mikroreakce: RPR, VDRL atd..

U primárního a sekundárního syfilis je citlivost nontreponemálních testů vysoká (v případě RPR: 86% pro primární, 100% pro sekundární) a čím vyšší je citlivost metody, tím větší je pravděpodobnost, že test detekuje nemoc. Pokud je tedy nemocná se syfilisem, bude výsledek testu se 100% citlivostí rozhodně pozitivní.

Při použití nontreponemálních testů je však možný i falešně pozitivní výsledek (detekce protilátek, přestože osoba není syfilis nemocná). Faktem je, že protilátky proti kardiolipinu se vyskytují nejen u syfilis, ale také u některých jiných onemocnění.

Proto by se v diagnostice syfilis měl nontreponemální test potvrdit pomocí konkrétnějšího treponemálního testu..

Nontreponemální testy mají další vlastnost. Protilátky proti kardiolipinu se objevují v akutní fázi onemocnění. Proto, když se osoba zotaví, její hladina klesá, takže ji lze použít k posouzení úspěšnosti léčby.

Na co se studie používá??

  • Pro primární diagnózu syfilis.
  • Vyhodnotit úspěšnost léčby.

Když je naplánována studie?

  • Při screeningu na syfilis. Měly by být vyšetřeny těhotné ženy, dárci krve (a orgány), zástupci určitých profesí (lékaři, pracovníci v oblasti výživy, lidé v kontaktu s dětmi, pacienti před hospitalizací nebo chirurgickým zákrokem).
  • Pokud je podezření na syfilis (pokud má pacient příznaky syfilis, vředy na genitáliích nebo jiné infekce genitálií, jakož i pokud má jeho sexuální partner syfilis). Zejména když se dítě narodilo od matky se syfilisem.
  • Po léčbě syfilis.

Co znamenají výsledky??

Referenční hodnoty: Negativní.

  • Neexistuje žádný syfilis. Jiné možnosti však nelze zcela vyloučit..
    • Syfilis v rané fázi. Pokud od infekce uplynulo méně než 3–5 týdnů, protilátky proti kardiolipinu ještě nebyly detekovány. Test by se měl opakovat po 10-14 dnech..
    • Syfilis v pozdní fázi. Po stadiu sekundárního syfilisu se snižuje počet kardiolipinových protilátek. Například citlivost metody VDLR na terciární syfilis je 70% (tj. 30% pacientů bude mít negativní výsledek).
    • Falešně negativní výsledek (ve vzácných případech). Existuje „prozónový efekt“: pokud existuje příliš mnoho protilátek (příliš vysoký titr), může být výsledek negativní.

Konečné rozhodnutí o diagnóze závisí na výsledku jiných testů (treponemal).

  • Syfilis.
  • Falešně pozitivní výsledek. V tomto případě je titr protilátky obvykle velmi nízký..

Pozitivní výsledek musí být potvrzen pomocí specifických treponemálních testů..

Co znamenají výsledky testu, které se opakují (po průběhu léčby)??

  • Pokud byl výsledek negativní nebo titr klesl čtyřikrát nebo více - léčba byla úspěšná.
  • Pokud se titr nesnížil - je třeba se poradit s lékařem a dále studovat.

Co může výsledek ovlivnit?

Falešně pozitivní výsledky mohou být:

  • s autoimunitními poruchami (například se systémovým lupus erythematodes, tyreoiditidou),
  • s leprou, infekcí HIV, SARS, malárií atd..,
  • u lidí, kteří injekčně užívají drogy,
  • u starších lidí.

Kdo předepisuje studii?

Praktický lékař, praktický lékař, specialista na infekční choroby, venereolog.

Laboratorní metody pro diagnostiku syfilis

Test syfilis je jedním z nejběžnějších laboratorních testů. Testy na syfilis se často používají při preventivních prohlídkách. Pomocí mikroskopie se odhalí původce syfilis - bledý treponém. S pomocí sérologických reakcí je potvrzena diagnóza syfilis, je stanovena diagnóza latentního syfilis, je sledována účinnost léčby, je stanovena léčba pacientů.

Diagnóza syfilis je stanovena na základě klinických údajů, detekce patogenů syfilis ve vzorcích materiálu a potvrzení diagnózy sérologickými výzkumnými metodami. Projevy syfilis jsou četné a rozmanité, a proto je nemoc detekována lékaři různých specialit. Diferenciální diagnostika primárního syfilisu se provádí s řadou chorob.

Obr. 1. Na fotografii je primárním projevem syfilis tvrdý kancléř.

Protilátky proti bledému treponému a sérologické diagnostice

Při infekci syfilisem se v těle pacienta tvoří protilátky. Sérologická diagnostika pomáhá lékaři studovat dynamiku tvorby protilátek v těle pacienta se syfilisem v počátečních stádiích nemoci, během léčby a po ní, řešit problém relapsu pacienta nebo reinfekce (reinfekce), diagnostikovat syfilis v hromadných zdravotních podmínkách.

Protilátky proti bledému treponému IgM

První protilátky IgM, které se vytvoří po infekci. Začínají být detekovány sérologickými reakcemi od druhého týdne po infekci. Po 6 - 9 týdnech nemoci se jejich počet zvýší. Pokud pacient nebyl léčen, protilátky zmizí po šesti měsících. IgM protilátky zmizí po 1 - 2 měsících. po léčbě časného syfilisu, po 3 - 6 měsících. - po léčbě pozdního syfilisu. Pokud je zaznamenán jejich růst, jedná se o příznak recidivy syfilisu nebo o opakované infekci. IgM molekuly jsou velké a nepřecházejí placentou k plodu.

IgG treponema protilátky

Protilátky IgG imunoglobuliny se objevují na konci prvního měsíce (ve 4. týdnu) od okamžiku infekce. Jejich titr je vyšší než titr IgM. IgG přetrvává po vytvrzení po dostatečně dlouhou dobu.

Nespecifické protilátky

Existuje mnoho sérologických reakcí. Je to způsobeno antigenní multiplicitou bledých treponémů. V krevním séru nemocného v různých stádiích syfilis se kromě specifických vytváří jedna nebo jiná nespecifická protilátka - aglutininy, komplementová pojiva, imobiliziny, protilátky, které způsobují imunitní fluorescenci, precipitiny atd. Sérologické reakce na detekci nespecifických protilátek mají proto relativní specificitu, a proto se vyhýbají diagnostickým chybám, by neměl používat jednu, ale komplex sérologických reakcí (DAC).

Falešně pozitivní testy na syfilis

Charakteristickým rysem nontreponemálních testů je příjem falešně pozitivních reakcí. Protilátky reaginů, které jsou produkovány v krvi osoby proti kardiolipinovému antigenu, se zaznamenávají nejen pro syfilis, ale také pro jiná onemocnění: kolagenózy, hepatitidy, onemocnění ledvin, tyreotoxikóza, onkologická onemocnění a infekční onemocnění (malomocenství, tuberkulóza, brucelóza, malárie, sirup,, šarlatová horečka), během těhotenství a měsíčních cyklů, při užívání mastných potravin a alkoholu. Je třeba poznamenat, že s věkem se počet falešně pozitivních reakcí zvyšuje..

Obr. 2. Na fotografii primární syfilis u žen.

Laboratorní diagnostika syfilis pomocí sérologických reakcí

Sérologické testy na syfilis se dělí na treponemální a nontreponemální.

1. Nontreponemální testy

Kardiolipinový antigen se v této skupině testů používá jako antigen. Lipidové antigeny patogenů syfilis jsou nejpočetnější. Tvoří 1/3 suché buněčné hmoty. Pomocí netreponemálních testů jsou detekovány reaginové protilátky, které jsou produkovány proti antigenu kardiolipinu. Tato skupina zahrnuje reakci vázání komplementu (RSCcard), mikroprecipitační reakci (RMP), reakci rychlého stanovení plazmatických reaginů (RPR) atd. Pomocí nontreponemálních testů se provádí primární screening na syfilis (vyšetření skupin populace) a možnost získání výsledků v kvantitativní formě umožňuje tyto testy použít ke sledování účinnosti léčby. Pozitivní výsledky nontreponemálních testů by měly být potvrzeny treponemálními testy. Charakteristickým rysem nontreponemálních testů je příjem falešně pozitivních reakcí..

2. Treponemální testy

Treponemální testy používají treponemální antigeny izolované z bledé treponemální kultury. S jejich pomocí se potvrzují pozitivní výsledky nerereponemálních testů. Skupina zahrnuje: RSKstrep - fixační reakce komplementu, RIF - imunofluorescenční reakce a její modifikace, RIT, RIBT - bledá treponemální imobilizační reakce, RPHA - pasivní hemaglutinační reakce, ELISA - enzymatická imunoanalýza.

3. Zkoušky na syfilis za použití rekombinantních antigenů

Antigeny pro tuto skupinu testů se získávají genetickým inženýrstvím a používají se v reakcích - RPHA a ELISA, při analýze imunoblottingu (IB) a imunochromatografické analýze.

Obr. 3. K diagnostice syfilis se používá komplex sérologických testů..

Diagnóza syfilis pomocí nerereponemálních testů

K detekci syfilis se používají nerereponemální testy nebo komplex sérologických reakcí (CSR). Sérologická diagnostika bude používána od 5. týdne od okamžiku infekce nebo od 2–3 týdnů po objevení se pevného chancre. Protilátky jsou detekovány téměř u všech pacientů s čerstvým primárním, sekundárním a recidivujícím syfilisem. Sérologické reakce jsou pozitivní u 70 - 80% pacientů s terciárním aktivním syfilisem, v 50 - 60% případů u pacientů s terciárním latentním syfilisem.

Sérologické reakce pomocí nontreponemálních testů mohou vést k falešně pozitivním výsledkům..

Obr. 4. Odběr krve pro syfilis.

Doplňte vazebnou reakci (karta CSC, KSK s KA, Wassermanova reakce)

Wassermanova reakce (RW, RV), vynalezená A. Wassermanem před více než 100 lety, dnes prošla mnoha změnami, avšak jako hold tradici si své jméno dodnes zachovala. Reakce vázající komplement s použitím kardiolipinového antigenu je určena nejen k detekci protilátek, ale je také prováděna v kvantitativní verzi - s různým ředěním séra, což umožňuje použití k monitorování účinnosti léčby. Negativní aspekty tohoto typu studie jsou nízká citlivost a specificita, získání falešně pozitivních výsledků.

Podstata Wassermanovy reakce je následující: antigeny, které se používají při formulaci Wassermanovy reakce, v případě přítomnosti protilátek proti patogenům syfilisu v lidské krvi, se k nim váží pomocí komplimentu a precipitují. Intenzita reakce je označena znaménkem (+). Reakce může být negativní (-) - nepřítomnost sraženiny, pochybná (malá sraženina nebo +), slabě pozitivní (++), pozitivní (+++) a ostře pozitivní (++++).

Citlivější je modifikovaná Wassermannova reakce - Colmerova reakce. S jeho pomocí jsou protilátky detekovány v séru, kde Wassermanova reakce vedla k negativnímu výsledku..

Při ostře pozitivních reakcích se provádí kvantitativní stanovení reakčních látek, u nichž se sérum používá v ředění 1:10 až 1: 320, což umožňuje použití tohoto typu studie ke sledování účinnosti léčby. Například snížení titru protilátek a jejich následné séronegivace (získání negativních výsledků) naznačuje úspěšné vyléčení nemoci.

Obr. 5. Krevní test na syfilis - Wassermanova reakce.

Srážková mikroreakce (MCI)

Precipitační mikroreakce se používá pro hromadné vyšetření určitých skupin populace, diagnostiku syfilis a sledování účinnosti léčby. K provedení tohoto typu výzkumu je zapotřebí malé množství studovaného materiálu. Srážení mikroreakce je založeno na imunologické reakci antigen-protilátka. V případě protilátek v krevním séru subjektu se komplex antigen-protilátka vysráží za vzniku vloček. Reakce se provádí v otvorech speciální skleněné desky. Odhaduje se podle intenzity sraženiny a velikosti vloček v (+) jako Wassermannova reakce. Při vyšetřování těhotných žen se dárci a ke sledování účinnosti léčby nepoužívá. VDRL a RPR jsou odrůdy mikroreakcí.

Obr. 6. Typ srážkové reakce v kapce na sklo.

Obr. 7. Krevní test na syfilis - mikroprecipitační reakce.

Obr. 8. Sada pro provádění reakce rychlého stanovení plazmatických reaginů (Test na syphilis RPR).

Všechny pozitivní testy získané během nespecifických sérologických reakcí vyžadují potvrzení specifickými reakcemi - treponemální testy.

Diagnóza syfilis pomocí treponemálních testů

Při provádění treponemálních testů se používají antigeny treponemálního původu. Jejich negativní stránkou je neschopnost sledovat účinnost léčby, získat pozitivní výsledky pro spirochetózu a nevenerální treponematózy a získat falešně pozitivní výsledky u rakoviny, lepry a některé endokrinní patologie. Testy jako RPHA, ELISA a RIF zůstávají pozitivní po mnoho let po léčbě syfilis a v některých případech po celý život.

RIBT a RIF jsou konkrétnější ze všech sérologických reakcí použitých k diagnostice syfilis. Umožňují rozlišit falešně pozitivní reakce, identifikovat pozdní formy syfilis, které se vyskytují s negativními reakcemi. Pomocí RIBT jsou falešně pozitivní reakce u těhotných žen rozpoznány, pokud je nutné vyřešit problém infekce dítěte.

Imobilizace světlých treponemů (RIBT, RIT)

Podstatou reakce je to, že protilátky v krevním séru pacienta imobilizují bledé treponémy. Reakce se považuje za negativní, když znehybňuje až 20% patogenů, slabě pozitivní - 21 - 50%, pozitivní - 50 - 100%. RIBT někdy dává falešně pozitivní výsledky. Test je složitý a časově náročný, je však nezbytný v diferenciální diagnostice latentních forem nemoci a falešně pozitivních výsledcích sérologických reakcí, a to iu těhotných žen. RIBT dává 100% pozitivní výsledek se sekundárním, časným a pozdním syfilisem, v 94 - 100% případů s jinými formami syfilisu.

Imunofluorescenční reakce (RIF)

Podstatou reakce je, že bledé treponémy (antigeny) spojené s protilátkami značenými fluorochromy emitují v luminiscenčním mikroskopu žlutozelenou záři. Výsledek je vyhodnocen znaménkem plus (+). Pomocí RIF se detekují imunoglobuliny třídy A. Imunofluorescenční reakce je pozitivní dříve než Wassermanova reakce. U sekundárních a latentních syfilis je vždy pozitivní, u 95 - 100% případů pozitivních u terciárních a vrozených syfilisů. Technika provádění tohoto typu studia je jednodušší než metoda RIBT, ale není možné nahradit RIF RIBT, protože tato reakce je ve specifičnosti nižší než RIBT. RIF-10 (modifikace RIF) je citlivější, konkrétnější jsou RIF-200 a RIF-abs.

Obr. 9. Krevní test na syfilis - imunofluorescenční reakce (RIF).

Imunitní adheze bledého treponému (RIPBT)

Podstatou reakce je to, že bledý treponém senzibilizovaný sérem pacienta ulpívá na povrchu červených krvinek v přítomnosti komplementu. Výsledné komplexy během centrifugace se vysráží. Citlivost tohoto testu a specificita jsou blízké RIF a RIBT.

Enzymově vázaný imunosorbentový test na syfilis (ELISA)

Pomocí ELISA jsou stanoveny imunoglobuliny třídy M a G. IgM - ELISA může být použit jako screeningový a potvrzovací test. Citlivost testu ELISA a jeho specificita jsou podobné jako u RIF. U syfilis poskytuje IFA pozitivní výsledky od třetího měsíce infekce a po dlouhou dobu (někdy celý život) zůstává pozitivní.

Obr. 10. Enzymatická imunotest.

Pasivní (nepřímá) hemaglutinační reakce (RPHA)

RPHA je založena na schopnosti červených krvinek, na kterých jsou adsorbovány antigeny bledého treponému, se slepit v přítomnosti pacientova séra (hemaglutinace). RPGA se používá k diagnostice všech forem syfilis, včetně latentních. Při použití vysoce kvalitního antigenu překračuje tento typ sérologické reakce všechny ostatní testy na specificitu a citlivost..

Obr. 11. RPGA se používá k diagnostice všech forem syfilis.

Obr. 12. Analýza syfilis - reakce pasivní (nepřímé) hemaglutinace (schéma).

Obr. 13. Pohled na obrácený deštník, který zabírá celé dno zkumavky, naznačuje pozitivní reakci. V případě, že se červené krvinky usadí ve sloupci („tlačítko“) ve středu dna zkumavky, označují negativní reakci.

Obr. 14. Laboratorní RPHA test.

Mikrobiologická diagnostika

Spolu se sérologickou diagnostikou hraje důležitou roli i metoda detekce bledých treponemů (mikrobiologická diagnostika), zejména při seronegativní syfilii, kdy protilátky stále chybí v krvi, ale již existují první projevy čerstvého primárního syfilisu (tvrdé kancléře).

Biologickým materiálem pro studium je výtok z povrchu pevných vředů (chancres), obsah pustulárního syfilis, plačící a erozivní papuly, punktát infikovaných lymfatických uzlin, mozkomíšního moku a plodové vody, pro PCR - krev.

Nejlepší metodou pro detekci patogenů syfilis je studium biologického materiálu v tmavém poli mikroskopu. Tato technika umožňuje vidět bledý treponém v živém stavu, studovat jeho strukturální rysy a pohyby, odlišit patogenní patogeny od saprofytů.

Obr. 15. Syphilisova analýza - mikroskopie v tmavém poli.

Obr. 16. Při studiu suchých nátěrů se používá skvrna Romanovsky-Giemsa. Zároveň bledé treponémy zčervenají, všechny ostatní druhy spirochetů zbarví do purpurů.

Detekce světlých treponemů pod mikroskopem v tmavém poli je absolutním kritériem pro konečnou diagnózu syfilis.

Obr. 17. K detekci bakterií se používá imunofluorescenční reakce (RIF) - treponemální test. Specifický komplex antigen-protilátka, pokud je kombinován se specifickým sérem značeným fluorochromem, ve světle luminiscenčního mikroskopu dává bakteriím záři nazelenalé barvy.

Obr. 18. Původci syfilis jsou jasně viditelní v nátěrech připravených podle Levaditi techniky (impregnace stříbrem). Bledé treponémy tmavé barvy na pozadí žlutého zabarvení buněk infikovaných tkání.

Obr. 19. Příčinný původce syfilisu s vícenásobným zvýšením.

Obr. 20. Fotografie ukazuje kolonii bledých treponémů. Získání bakteriální kultury je těžké. Prakticky nerostou na umělých živných médiích. Na médiu obsahujícím koňské a králičí sérum se kolonie objevují ve dnech 3 až 9.

PCR pro syfilis

Účinný a slibný dnes je způsob polymerázové řetězové reakce. PCR pro syfilis umožňuje získat výsledek během několika hodin a v materiálu odebraném pro diagnostiku může být přítomno alespoň několik patogenů.

Obr. 21. PCR pro syfilis vám umožní detekovat DNA nebo její fragmenty bledých treponém.

Citlivost této výzkumné metody závisí na přítomnosti bledých treponémů v biologickém materiálu a dosahuje 98,6%. Specifičnost tohoto testu do značné míry závisí na správném výběru cíle pro amplifikaci během diagnózy a dosahuje 100%.

Vzhledem k nedostatečně studovaným srovnávacím charakteristikám citlivosti a specificity přímých metod pro diagnostiku syfilis a PCR však tato metoda vyšetřování v Ruské federaci pro diagnostiku nemoci dosud není povolena..

PCR pro syfilis je povoleno provádět pouze v některých případech jako další metoda pro diagnostiku vrozené syfilidy, neurosyfilie, s obtížemi při diagnostice syfilis pomocí sérologických výzkumných metod u pacientů s HIV.

Obr. 22. Detekce bledé treponemové DNA pomocí PCR naznačuje buď přítomnost životaschopných bakterií, nebo pozůstatky mrtvých, ale obsahující schopné vytvářet další kopie jednotlivých sekcí chromozomální DNA..

Je Důležité Mít Na Paměti Dystonie

O Nás

Jak pravděpodobně víte, infarkt myokardu je mimořádný stav, který vyžaduje chirurgickou lékařskou péči. Z tohoto důvodu je důležité včas rozpoznat tento stav na základě tohoto s ohledem na jeho hlavní příznaky.